Mutacje BRCA1 w populacyjnym badaniu młodych kobiet z rakiem piersi cd

Przedmiotami tymi są dziadkowie macierzyńscy i ojcowscy z rodzin CEPH, a ich próbki są rutynowo wykorzystywane w badaniach genetycznych. Chociaż osoby te nie były częścią żadnego badania populacyjnego i nie ma w związku z tym zbyt wielu informacji na temat epidemiologicznych czynników ryzyka, nie są one podejrzewane o posiadanie jakichkolwiek odziedziczonych predyspozycji do chorób nowotworowych. Badanie przesiewowe za pomocą oligonukleotydów swoistych dla allelu
Testy hybrydyzacji przeprowadzono z sondami oligonukleotydowymi odpowiadającymi mutacjom w odcinkach 2, 11Pi, 20 egzonów i donorach splicingowych i akceptorowych w intronie 5.23 Genomowy DNA ze wszystkich 80 pacjentów amplifikowano z primerami dla odpowiedniego segmentu egzonu. Produkty PCR zostały następnie poddane denaturacji i nałożone na filtr nylonowy Genescreen z 96-dołkowym aparatem typu dot blot. Hybrydyzację ze zmutowanymi lub normalnymi oligonukleotydami przeprowadzono jak opisano wcześniej. Wszystkie mutacje potwierdzono przez sekwencjonowanie w przód i tył (dwukierunkowe) produktu PCR.
Sekwencjonowanie DNA
Dla każdego wariantu zidentyfikowanego przez analizę SSCP, przypuszczalny zmutowany allel eluowano z żelu, a fragmenty ponownie amplifikowano z oryginalną parą starterów. W każdym przypadku odpowiedni fragment DNA amplifikowano również do bezpośredniego sekwencjonowania za pomocą 100 ng genomowego DNA jako matrycy. Wszystkie produkty PCR sekwencjonowano dwukierunkowo za pomocą zestawu do sekwencjonowania cyklicznego Applied Biosystems Taq DyeDeoxy zgodnie z instrukcjami producenta. Próbki analizowano za pomocą sekwencera Applied Biosystems 373A.
Wyniki
Charakterystyka pacjentów
Tabela 1. Tabela 1. Charakterystyka 214 kobiet, u których rak piersi został zdiagnozowany przed ukończeniem 35. roku życia i podgrupy 80 kobiet poddanych badaniom na mutacje BRCA1. Tabela podsumowuje charakterystykę wszystkich 214 kobiet z badania populacyjnego, w którym rozpoznano raka piersi przed 35 rokiem życia i podgrupę 80 kobiet, dla których próbki DNA były dostępne do analizy mutacji BRCA1. Historie rodzinne podgrupy były podobne do historii grupy jako całości. Podgrupa miała wyższy odsetek kobiet z rakiem in situ niż grupa jako całość (19 procent w porównaniu z 11 procentami), a kobiety w podgrupie częściej przeżyły raka piersi (94 procent w porównaniu z 77 procentami) . Te różnice w stadium raka i przeżycia prawdopodobnie odzwierciedlają opóźnienie między diagnozą a pobieraniem krwi od kobiet, których rak został zdiagnozowany na wczesnym etapie badania. Jeden z ostatnich raportów sugeruje, że przeżywalność kobiet z rakiem piersi, którzy zawierają zmutowane allele BRCA1, może być większa niż u niewyselekcjonowanych kobiet z rakiem piersi.24 Jeśli ta obserwacja jest prawidłowa, możliwe jest, że nasza próbka 80 kobiet może mieć tendencję do nieznacznie przecenia odsetek przypadków z udziałem BRCA1.
Charakterystyka zmian w sekwencji BRCA1 linii zarodkowej
Rysunek 1. Rysunek 1. Strategia używana do ekranowania mutacji BRCA1. Genomowy DNA z podgrupy 80 kobiet zapisanych w dużym badaniu populacyjnym wczesnego raka piersi analizowano pod kątem mutacji w genie BRCA1
[przypisy: poradnia psychologiczna ursynów, usg poznan, chirurg naczyniowy warszawa nfz ]

Tags: , ,

Leave a Reply

Powiązane tematy z artykułem: chirurg naczyniowy warszawa nfz poradnia psychologiczna ursynów usg poznan